人胱氨酸(Cystine) elisa试剂盒 

产品货号:BES0473K

产品规格: 48T/96T 

产品灵敏度: 最小可检测剂量小于等于0.057ng/mL 

产品检测范围:0.156-10ng/mL 

适用范围:本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断,适用于人血清、血浆、组织匀浆、 细胞培养上清及其它生物体液。

检测原理

博尔森生物生产的 ELISA 试剂盒采用“夹心法”:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标 准品中的靶蛋白,生物素化的检测抗体与靶蛋白结合, SABC 复合物与生物素化检测抗体结 合,形成免疫复合物,加入 TMB 显色液后,若反应孔中有靶蛋白则显蓝色,加入终止液变黄 色,检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在 450 nm 处测 OD 值,靶蛋白浓度与 OD 值之 间呈正比,通过绘制标准曲线计算出标本中靶蛋白的浓度。

按操作顺序形成抗体夹心结构后,加入TMB 底物,板孔液体由无色变成蓝色,再加入终止液 液体变为黄色后进行吸光度值测定。

检测程序

1. 加样:空白孔加入 100μl 标准品/样品稀释液,其余孔各加入标准品或待测样品 100ul, 将反应板混匀后置 37℃,60 分钟。 

2. 洗板:用 1×洗涤液将反应板充分洗涤 3 次,每孔加入 1×洗液 300μl,每次震荡/浸泡 1-2 分钟,向滤纸上印干。 

3. 空白孔加入 100ul 标准品/样品稀释液,其余孔各加入 1×的生物素化抗体工作液 100ul, 混匀后置 37℃,60 分钟。 

4. 洗板:同上。 

5. 每孔加入 SABC 工作液 100ul,混匀后置 37℃,30 分钟。 

6. 洗板:同上。 

7. 每孔加入 TMB 显色底物 100ul,混匀后置 37 ℃暗处反应 10-20 分钟(具体显色时间根据 显色结果而定)。 

8. 每孔加入 50ul 终止液,混匀,5 分钟内用酶标仪在 450nm 处测吸光值。 

结果判断和计算

1. 所有 OD 值建议减除空白孔值后再进行计算,如空白孔 OD 低于 0.1,也可以直接计算。 

2. 以标准品浓度作横坐标,OD 值作纵坐标,手工绘制或用软件绘制标准曲线,根据样品 OD 值计算出相应含量,再乘以稀释倍数即可。